착물 형성 적정

착물 형성 반응은 금속 이온과 하나 이상의 리간드가 배위 결합을 형성하여 착물 또는 배위 화합물을 생성하는 과정이다. 이 반응은 화학량론적으로 진행되며, 분석 화학에서 금속 이온의 정량적 분석을 위한 적정법의 기초를 이룬다. 반응의 일반식은 M + nL ⇌ MLn으로 나타낼 수 있으며, 여기서 M은 금속 이온, L은 리간드, n은 배위수를 의미한다.

반응의 특성은 사용되는 리간드의 종류에 크게 의존한다. 에틸렌다이아민테트라아세트산(EDTA)과 같은 킬레이트 리간드는 하나의 금속 이온에 여러 개의 배위 자리를 제공하여 고리 구조를 형성하는데, 이를 킬레이트 효과라고 한다. 이 효과로 인해 생성된 착물은 단일 배위 리간드를 사용할 때보다 훨씬 더 안정하다. 따라서 EDTA는 대부분의 다가 금속 이온과 1:1의 화학량론으로 매우 안정한 착물을 형성하여, 착물 형성 적정에서 가장 널리 사용되는 적정제이다.

착물 형성 반응의 진행 정도는 용액의 pH에 민감하게 영향을 받는다. 많은 리간드, 특히 EDTA는 양성자와 결합할 수 있는 작용기를 가지고 있어, 용액의 pH가 낮을수록 리간드의 유효 농도가 감소한다. 따라서 특정 금속 이온을 정량하기 위해서는 반응이 충분히 진행될 수 있도록 적절한 pH 조건을 완충 용액으로 유지해야 한다. 예를 들어, 칼슘 이온과 마그네슘 이온의 적정은 일반적으로 pH 10 근처에서 수행된다.

이 반응을 이용한 적정에서는 종말점을 판독하기 위해 금속 지시약이 사용된다. 지시약은 자체적으로 금속 이온과 착물을 형성해 특정 색을 나타내지만, 적정제인 EDTA가 금속 이온과 더 강하게 결합하면 지시약이 유리되면서 색이 변한다. 이 색의 변화를 통해 반응의 종말점을 정확히 확인할 수 있다.

금속 이온은 착물 형성 적정의 핵심 분석 대상이다. 주로 전이 금속 이온들이 분석되며, 이들은 불완전하게 채워진 d 궤도 함수를 가지고 있어 다양한 리간드와 배위 결합을 형성하는 강한 경향을 보인다. 대표적으로 구리(II), 아연(II), 칼슘(II), 마그네슘(II), 철(III), 니켈(II) 이온 등이 있다.

리간드는 금속 이온에 배위하여 착물을 이루는 분자나 이온을 말한다. 적정에 사용되는 리간드는 일반적으로 킬레이트 리간드로, 하나의 리간드 분자가 두 개 이상의 배위 자리를 통해 금속 이온을 감싸듯이 결합한다. 가장 널리 쓰이는 리간드는 에틸렌다이아민테트라아세트산(EDTA)이다. EDTA는 6개의 배위 원자(질소 2개, 산소 4개)를 가져 대부분의 2가 및 3가 금속 이온과 1:1 착물을 형성하며, 높은 안정도 상수를 보인다.

금속 이온과 리간드 간 결합의 강도는 착물의 안정성을 결정하며, 이는 적정의 정확도와 선택성에 직접적인 영향을 미친다. 착물의 안정성은 금속 이온의 종류, 리간드의 구조, 용액의 pH 등 여러 요인에 의해 좌우된다. 예를 들어, EDTA와 금속 이온이 형성하는 착물의 안정도 순서는 다음과 같다.[3]

이러한 안정도 차이를 이용하면 혼합 용액에서 특정 금속 이온만을 선택적으로 적정하거나, 마스킹제를 사용해 방해 이온을 제거하는 것이 가능해진다.

안정도 상수는 착물의 형성 정도를 정량적으로 나타내는 평형 상수이다. 이는 착물이 얼마나 강하게, 또는 안정하게 형성되는지를 나타내는 척도로 사용된다. 일반적으로 착물 형성 반응의 평형을 나타내는 형성 상수 또는 누적 형성 상수를 의미한다. 예를 들어, 금속 이온 M과 리간드 L이 1:1 착물 ML을 형성할 때, 그 형성 반응과 상수는 다음과 같이 표현된다.

M + L ⇌ ML

K_f = [ML] / ([M][L])

여기서 K_f가 형성 상수이며, 그 값이 클수록 착물의 안정도가 높다는 것을 의미한다. 여러 개의 리간드가 단계적으로 결합하는 경우에는 각 단계마다 단계별 형성 상수가 정의된다.

안정도 상수는 착물 형성 적정에서 종말점 판독의 예리함과 정확도에 직접적인 영향을 미친다. 적정에 사용되는 킬레이트 적정제와 분석 대상 금속 이온 사이의 착물 안정도 상수가 충분히 커야 명확한 종말점을 얻을 수 있다. 일반적으로 log K_f 값이 8 이상이어야 적정에 유용하게 사용된다고 판단한다[4].

다음은 몇 가지 대표적인 금속-EDTA 착물의 조건부 형성 상수(log K_f')를 pH에 따른 예로 보여준다. 조건부 형성 상수는 특정 pH 조건에서의 유효한 안정도를 나타낸다.

이 표에서 알 수 있듯이, EDTA와 같은 킬레이트 적정제는 pH에 따라 그 결합 강도가 크게 달라진다. 따라서 적정 시 적절한 완충 용액을 사용하여 pH를 조절하는 것은 필수적이다. 안정도 상수는 또한 금속 지시약의 선택 기준이 되며, 지시약-금속 착물의 안정도 상수는 적정제-금속 착물의 안정도 상수보다 작아야 정확한 종말점에서 색변화가 일어난다.

직접 적정은 분석하려는 금속 이온 시료 용액에 적절한 금속 지시약을 가한 후, 표준 킬레이트 리간드 용액(예: EDTA)으로 적정하여 종말점에서의 소비량으로 금속 이온의 농도를 계산하는 방법이다. 이 방법은 시료 중의 금속 이온이 리간드와 1:1의 안정한 착물을 형성하며, 반응 속도가 충분히 빠르고 명확한 종말점을 얻을 수 있을 때 적용된다.

적정 과정에서 금속 이온(Mⁿ⁺)과 킬레이트제(Y⁴⁻)는 다음과 같은 반응을 일으킨다.

Mⁿ⁺ + Y⁴⁻ → MYⁿ⁻⁴

반응이 진행됨에 따라 자유 금속 이온의 농도는 감소한다. 종말점 직전까지는 지시약(In)이 금속 이온과 결합한 상태(MIn)를 유지하여 특정 색을 띤다. 종말점에 도달하면, 미량의 자유 금속 이온이 모두 소모된 후, EDTA가 MIn 착물로부터 금속 이온을 빼앗아 더 안정한 MY 착물을 형성한다. 이로 인해 지시약이 유리되어 색이 변하게 된다.

직접 적정의 성공 여부는 실험 조건에 크게 의존한다. 적정은 일반적으로 완충 용액을 사용하여 일정한 pH를 유지하면서 진행된다. pH는 착물의 안정도와 지시약의 변색 범위에 영향을 미치기 때문이다. 또한, 적정 중에 다른 금속 이온에 의한 방해가 발생하지 않도록 마스킹제를 사용하거나 pH를 조절하여 방해 이온을 제거할 수 있어야 한다.

이 방법은 간단하고 빠르며 정확도가 높아, 경수의 칼슘 이온과 마그네슘 이온 농도 측정 등 다양한 정량 분석에 널리 사용된다.

역적정은 분석 대상 금속 이온이 적정제와 너무 느리게 반응하거나, 적정 과정에서 침전이 생기거나, 적절한 금속 지시약이 없는 경우에 사용하는 방법이다. 직접 적정이 어려울 때 유용한 대안을 제공한다.

이 방법은 먼저 측정하고자 하는 금속 이온 시료에 대해, 정량적으로 과량의 착화제 표준 용액을 가하는 것으로 시작한다. 과량으로 가해진 착화제는 시료 속의 모든 금속 이온과 반응하여 착물을 형성한다. 이후, 반응 후 남은 과량의 착화제를 다른 금속 이온 표준 용액으로 역으로 적정하여 그 양을 구한다.

초기에 가한 착화제의 총량에서 남은 양을 뺌으로써, 실제 시료의 금속 이온과 반응한 착화제의 양을 간접적으로 계산할 수 있다. 이를 통해 원래 시료에 존재하던 금속 이온의 농도나 양을 결정한다. 예를 들어, 칼슘 이온이나 마그네슘 이온을 정량할 때, 과량의 EDTA를 가한 후 남은 EDTA를 아연 이온 표준 용액으로 적정하는 방식이 흔히 사용된다[5].

역적정법은 다음 표와 같은 경우에 특히 선호된다.

이 방법은 직접 적정의 한계를 극복하고, 보다 정확하고 재현 가능한 결과를 얻을 수 있게 해준다.

치환 적정은 분석 대상 금속 이온이 착물을 형성하는 경향이 너무 강하거나 너무 약하여 직접 금속 지시약으로 종말점을 판독하기 어려울 때 사용하는 간접적 방법이다. 이 방법에서는 먼저 분석 대상 금속 이온(M^A^)과 안정한 착물을 형성하는 리간드(L)를 과량 첨가한다. 이때 생성된 착물 M^A^L은 분석 대상 이온을 모두 포획한다.

그 후, 이 착물 M^A^L보다 더 안정한 착물을 형성할 수 있는 다른 금속 이온(M^B^)의 표준 용액으로 적정한다. 적정제인 M^B^ 이온은 M^A^L 착물로부터 A 금속 이온을 치환하여 자유 리간드(L)를 방출한다. 방출된 리간드는 즉시 M^B^ 이온과 새로운 착물 M^B^L을 형성한다. 모든 리간드가 M^B^ 이온과 결합하면, 과량의 M^B^ 이온이 용액 중에 나타나고, 이는 금속 지시약의 색 변화로 종말점을 알린다.

치환 적정의 대표적인 예는 칼슘 이온(Ca²⁺)의 정량이다. Ca²⁺은 많은 금속 지시약과의 색 변화가 뚜렷하지 않다. 따라서 먼저 Ca²⁺ 과량에 에틸렌다이민테트라아세트산(EDTA, Y⁴⁻)을 가해 안정한 CaY²⁻ 착물을 만든다. 그 다음, 마그네슘 이온(Mg²⁺) 표준 용액과 에리오크롬 블랙 T 지시약을 사용하여 적정한다. Mg²⁺ 이온이 CaY²⁻로부터 Ca²⁺을 치환하여 MgY²⁻를 만들고, 방출된 EDTA는 다시 Mg²⁺과 반응한다. 최종적으로 모든 EDTA가 소모된 후 과량의 Mg²⁺이 지시약과 반응하여 용액의 색이 청색에서 적자색으로 변한다.

이 방법은 다음과 같은 경우에 유용하게 적용된다.

치환 적정을 통해 직접 적정이 불가능한 많은 금속 이온을 정확하게 정량할 수 있다.

금속 지시약은 대부분 유기 염료 화합물로, 자체적으로는 리간드 역할을 하여 금속 이온과 가역적으로 결합하여 착물을 형성한다. 이때 지시약-금속 착물의 색과 자유 지시약의 색이 뚜렷하게 다르다. 적정 과정에서, 킬레이트 적정제인 EDTA와 같은 착화제가 시료 용액 속의 모든 자유 금속 이온과 먼저 반응한다. 종말점에 도달하면, EDTA는 지시약-금속 착물보다 더 안정한 착물을 형성하는 경향이 있기 때문에, 지시약이 결합하고 있는 금속 이온을 빼앗는다. 이로 인해 지시약이 자유 상태로 방출되며, 용액의 색이 지시약-금속 착물의 색에서 자유 지시약의 색으로 급격하게 변화한다. 이 색의 전환이 종말점을 나타낸다.

지시약의 효과적인 작동을 위해서는 몇 가지 조건이 충족되어야 한다. 첫째, 지시약-금속 착물의 안정도는 EDTA-금속 착물의 안정도보다 낮아야 한다. 그렇지 않으면 종말점에서 EDTA가 금속 이온을 치환해내지 못해 색 변화가 일어나지 않거나 매우 느리게 일어난다. 둘째, 지시약은 분석 대상 금속 이온에 대해 선택적이어야 하며, 그 결합은 가역적이어야 한다. 셋째, 지시약과 그 착물은 적정이 이루어지는 pH 범위에서 충분히 용해되어야 하고, 색 대비가 뚜렷해야 한다.

pH는 지시약의 작용에 매우 중요한 변수이다. 많은 금속 지시약은 산-염기 지시약의 성질도 함께 가지는 경우가 많아, pH에 따라 자체의 색이 변할 수 있다. 또한 pH는 지시약의 해리 상태와 금속 이온과의 결합 강도를 결정한다. 따라서 각 지시약마다 최적의 pH 범위가 존재하며, 적정 시 완충 용액을 사용하여 이 pH를 정밀하게 유지하는 것이 필수적이다.

금속 지시약은 착물 형성 적정에서 종말점을 시각적으로 확인할 수 있게 해주는 핵심 시약이다. 이들은 대부분 유기 염료 화합물로, 자유 상태와 금속 이온과 착물을 형성한 상태에서 뚜렷하게 다른 색을 나타낸다. 적정 과정에서 킬레이트 형성제인 적정액이 시료 용액의 모든 금속 이온과 반응한 순간, 지시약이 금속 이온에서 떨어져 나오며 색변화가 일어난다.

가장 널리 사용되는 지시약 중 하나는 에리오크롬 블랙 T(EBT 또는 Eriochrome Black T)이다. 이는 pH 7-11 범위에서 마그네슘 이온(Mg²⁺), 아연 이온(Zn²⁺), 카드뮴 이온(Cd²⁺) 등의 적정에 사용된다. 자유 상태에서는 청색을 띠지만, 금속-착물을 형성하면 와인 레드색을 나타낸다. 칼슘 이온(Ca²⁺)과의 결합력이 약해, 마그네슘 이온이 존재할 때 더욱 날카로운 종말점을 제공한다.

다른 주요 금속 지시약의 특성은 다음과 같다.

무레크사이드는 칼슘 이온을 직접 적정할 때 사용되며, 높은 pH 조건에서 칼슘과 안정한 청색 착물을 형성한다. 자일레놀 오렌지는 산성 조건에서 비스무트(Bi³⁺)나 지르코늄(Zr⁴⁺)과 같은 금속 이온의 적정에 특화되어 있다. PAN은 넓은 pH 범위에서 사용 가능한 다목적 지시약이다. 각 지시약은 특정 금속 이온과의 결합 강도와 pH에 따른 색 변화 특성이 달라, 분석 대상에 따라 신중하게 선택해야 한다.

금속 지시약을 선택할 때는 적정의 정확도와 신뢰성을 보장하기 위해 몇 가지 중요한 기준을 고려해야 한다. 가장 핵심적인 기준은 지시약의 착물 형성 상수와 금속 이온-리간드 착물의 안정도 상수 사이의 관계이다. 지시약-금속 착물의 안정도는 분석 대상 금속-킬레이트 착물보다는 낮아야 하지만, 용액 내 다른 불순물 금속 이온과의 착물보다는 높아야 한다. 이렇게 해야만 적정 시약이 지시약과 결합한 금속을 정량적으로 빼앗아 종말점에서 명확한 색변화를 일으킬 수 있다.

두 번째로 중요한 기준은 작용 pH 범위이다. 대부분의 금속 지시약은 양성자를 방출하는 약산이므로, 그 색상과 금속 결합 능력은 용액의 pH에 크게 의존한다. 예를 들어, 에리오크롬 블랙 T는 pH 10 근처의 완충 용액에서 가장 잘 작동한다. 따라서 적정 반응에 적합한 pH 조건을 먼저 설정한 후, 해당 pH 범위에서 명확한 색변화(보통 유리 지시약의 색과 금속-지시약 착물의 색이 뚜렷하게 다름)를 보이는 지시약을 선택해야 한다.

기타 고려사항은 다음과 같다.

마지막으로, 지시약 용액의 안정성도 실용적인 요소로 고려된다. 일부 지시약은 공기 중의 산소에 의해 쉽게 산화되거나, 수용액 상태에서 시간이 지남에 따라 분해될 수 있다. 이러한 경우에는 신선하게 제조하거나 안정화제를 첨가하여 사용해야 한다.

착물 형성 적정은 수중에 존재하는 특정 금속 이온의 농도를 정량하는 데 널리 사용되는 분석 방법이다. 특히 경도를 구성하는 칼슘 이온과 마그네슘 이온의 총량을 측정하는 데 표준 방법으로 자리 잡았다. 수질 경도는 비누의 거품 생성 억제, 보일러 및 배관의 스케일 형성과 직접적인 연관이 있어 상수, 공업용수, 배수의 품질 관리에서 중요한 지표이다.

일반적으로 에틸렌다이민테트라아세트산(EDTA)이 킬레이트 적정을 위한 착화제로 사용된다. EDTA는 대부분의 2가 금속 이온과 1:1의 몰비로 매우 안정한 착물을 형성한다. 수질 시료에 완충 용액을 가해 pH를 10 정도로 유지한 후, 에리오크롬 블랙 T와 같은 금속 지시약을 첨가하면 시료는 와인색을 띤다. 이를 EDTA 표준 용액으로 적정하면, 자유 금속 이온이 먼저 EDTA와 결합하고, 모든 금속 이온이 착화된 후 지시약이 EDTA에 의해 금속 이온에서 떨어져 나와 지시약 본래의 청색을 나타낸다. 이 색의 변화가 종말점이 된다.

이 방법은 비교적 간단한 장비로 신속한 분석이 가능하며, 중금속 이온이 공존할 경우 적절한 마스킹제나 분리 과정을 통해 선택성을 높일 수 있다. 수질 분석에서 착물 형성 적정은 정확성과 경제성으로 인해 여전히 실험실 및 현장에서 중요한 자리를 차지하고 있다.

약품 분석에서 착물 형성 적정은 활성 성분의 함량을 정확히 측정하거나 특정 불순물을 검출하는 데 널리 사용된다. 특히 금속 이온을 함유한 의약품이나 금속 이온과 강하게 결합하는 유기 성분의 정량에 효과적이다. 예를 들어, 칼슘이나 마그네슘 이온을 주성분으로 하는 제산제, 또는 아연을 함유한 연고 등의 품질 관리에 적용된다.

일반적인 절차는 시료를 적절히 전처리한 후, EDTA와 같은 킬레이트 적정액으로 적정하는 것이다. 칼슘 글루코네이트 주사액의 경우, 시료를 취하여 암모니아 완충 용액으로 pH를 10 정도로 조절하고 에리오크롬 블랙 T를 지시약으로 사용하여 EDTA로 적정한다. 종말점에서 색이 적자색에서 순청색으로 변하면 칼슘 이온이 모두 킬레이트화되었음을 의미한다.

이 방법은 특정 금속 이온에 대해 높은 선택성을 가지므로 복잡한 배합 제제에서도 목표 성분만을 선택적으로 정량할 수 있다. 또한 기기 분석에 비해 상대적으로 장비가 간단하고 비용이 저렴하여 제약 현장의 일상적인 품질 검사에 적합하다. 분석 결과는 약전에 규정된 규격과 비교하여 제품의 적합 여부를 판정하는 근거로 사용된다.

착물 형성 적정은 금속 이온의 농도를 정확하게 측정하는 데 널리 사용되는 방법이다. 이 방법은 분석하려는 금속 이온과 킬레이트를 형성하는 리간드를 사용하여, 정량적인 착물 형성 반응을 바탕으로 한다. 대표적인 킬레이트 적정 시약으로는 에틸렌다이아민테트라아세트산(EDTA)이 있으며, 이는 대부분의 2가 및 3가 금속 이온과 1:1의 안정한 착물을 형성한다[9]. 적정 과정에서 금속 이온이 모두 킬레이트 시약과 반응하면, 용액의 색깔 변화를 통해 종말점을 확인할 수 있다.

금속 이온 정량에 있어서 선택성은 중요한 고려 사항이다. 단일 금속 이온만을 함유한 시료의 경우 직접 적정이 가능하다. 그러나 여러 종류의 금속 이온이 공존하는 복잡한 시료에서는 마스킹제를 사용하거나 pH를 조절하여 특정 금속 이온만을 선택적으로 적정한다. 예를 들어, 칼슘 이온과 마그네슘 이온이 함께 있는 경수를 분석할 때는 pH 10에서 에리오크롬 블랙 T 지시약을 사용해 두 이온의 총량을 측정한 후, 별도의 적정으로 칼슘만을 정량하여 마그네슘의 양을 간접적으로 구할 수 있다.

다양한 금속 이온의 정량 조건은 다음과 같이 정리할 수 있다.

이 방법은 광물, 합금, 촉매, 생물학적 시료 등에 포함된 금속 이온의 함량 분석에 응용된다. 정량 결과는 적정에 소비된 표준 용액의 부피와 농도, 그리고 금속 이온의 몰 질량을 바탕으로 계산하여 얻는다.

시료 준비는 착물 형성 적정의 정확성과 재현성을 결정하는 핵심 단계이다. 적절한 시료 준비 과정을 거치지 않으면 분석 결과에 큰 오차가 발생할 수 있다.

먼저, 분석 대상 시료를 대표성 있게 채취하고 균질화해야 한다. 고체 시료의 경우 분쇄 및 균질 혼합 후 정확히 칭량한다. 액체 시료는 필요한 경우 여과하여 불순물을 제거한다. 시료 중 목표 금속 이온의 예상 농도에 따라 적정에 사용될 표준 용액의 농도와 적정 부피가 적절하도록 시료의 양을 조절하거나 희석하는 것이 중요하다. 너무 농도가 높으면 한 번의 적정으로 종말점을 지나칠 수 있고, 너무 낮으면 종말점 판독의 불확실성이 커진다.

많은 경우, 시료에 방해 이온이 포함되어 있을 수 있다. 이러한 방해 이온은 리간드와 불필요한 착물을 형성하거나 금속 지시약과 반응하여 종말점 판독을 방해할 수 있다. 따라서 마스킹제를 사용하여 방해 이온을 가리거나, pH 조절을 통해 특정 이온만이 적정에 참여하도록 조건을 만드는 등의 전처리가 필요하다. 예를 들어, 트리에탄올아민은 알루미늄이나 철 이온을 마스킹하는 데 사용된다[10].

시료 용액의 산도는 EDTA와 같은 킬레이트 적정제와 금속 지시약의 반응에 직접적인 영향을 미치므로, 적정 전에 완충 용액을 사용하여 pH를 엄격하게 일정하게 유지하는 것이 필수적이다.

적정 용액과 시료 용액의 pH는 착물 형성 적정의 성공 여부를 결정하는 핵심 변수이다. 대부분의 금속 지시약은 pH에 따라 그 색깔과 착물 형성 능력이 변하며, 리간드인 적정제 자체의 금속 이온 결합 강도도 pH의 영향을 받는다. 따라서 적정 전반에 걸쳐 pH를 적절한 범위로 유지하고 조절하는 것은 정확한 종말점 판독과 재현성 있는 결과를 얻기 위한 필수 조건이다.

일반적으로 완충 용액을 사용하여 적정 과정 중 pH를 일정하게 유지한다. 사용하는 금속 지시약과 킬레이트 적정제에 따라 요구되는 최적 pH 범위가 다르므로, 이를 사전에 확인해야 한다. 예를 들어, 에리오크롬 블랙 T 지시약을 사용한 칼슘 이온이나 마그네슘 이온의 적정은 pH 10 근처의 암모니아 완충 용액에서 수행된다. 반면, 자일레놀 오렌지 지시약을 이용한 비스무트 이온의 적정은 pH 1~2의 강산성 조건에서 이루어진다.

pH 조절 시 고려해야 할 주요 사항은 다음과 같다.

pH 미조절 또는 부적절한 조절은 지시약의 색 변화가 불분명해지거나, 조기 종말점/지연 종말점을 초래하여 큰 오차를 유발할 수 있다. 따라서 적정 전 pH 측정기를 사용하여 용액의 pH를 정확히 측정하고, 필요한 경우 완충 용액을 추가하여 조정하는 절차가 반드시 선행되어야 한다.

적정의 종말점은 분석물과 적정 시약이 화학량론적으로 완전히 반응한 지점을 의미한다. 착물 형성 적정에서는 이 지점을 정확히 판독하는 것이 정량 분석의 정확도를 결정하는 핵심 요소이다.

주로 금속 지시약의 색 변화를 관찰하는 방법이 사용된다. 지시약은 자유 금속 이온과 결합하여 한 색을 띠다가, 적정제인 킬레이트 시약이 모든 금속 이온과 결합하면 지시약이 방출되면서 뚜렷한 색 변화를 보인다. 예를 들어, 에리오크롬 블랙 T는 마그네슘 이온과 붉은색 착물을 형성하지만, EDTA로 적정하여 모든 마그네슘 이온이 포착되면 청색으로 변한다. 색 변화가 선명하지 않거나 천천히 일어날 경우, 백색 배경에서 관찰하거나 적정 속도를 조절하여 판독 정확도를 높인다.

시각적 판독 외에도 기기적 방법을 활용할 수 있다. 전위차 적정은 금속 이온 선택성 전극을 사용하여 용액 내 금속 이온 농도의 급격한 변화를 전위차로 측정한다. 흡광도 측정을 이용한 광도 적정은 반응 종 또는 생성물의 흡광도 변화를 모니터링하여 종말점을 결정한다. 이러한 방법들은 색이 약한 시료나 시각적 판독이 어려운 경우에 유용하다.

종말점 판독 시 주의할 점은 다음과 같다.

정확한 종말점 판독을 위해서는 동일한 조건에서 블랭크 시험을 수행하여 보정하는 것이 좋다.